脂質(zhì)納米粒（Lipid Nanoparticles，LNP）是使用脂質(zhì)形成納米微粒的一種，作為一種高效、安全的藥物遞送體系，被廣泛研究和應(yīng)用，成為近年來發(fā)展最為迅速的制劑劑型之一，由于其制備過程需要進(jìn)行特殊的工藝化定制，故而脂質(zhì)納米粒類制劑也被稱為“高端復(fù)雜注射劑”。 在基因治療領(lǐng)域，已經(jīng)開始使用脂質(zhì)納米粒包裹核酸，如mRNA、siRNA、pDNA等，稱為核酸脂質(zhì)納米粒。

在這篇應(yīng)用報(bào)告中，我們使用丹東百特儀器公司新推出的BeNano 180納米粒度分析儀檢測了分散在水性環(huán)境中的LNP的粒徑。

脂質(zhì)納米粒LNP的粒徑檢測原理

我們采用丹東百特公司的BeNano 180納米粒度分析儀進(jìn)行測試。儀器使用波長671 nm，功率50 mW激光器作為光源，設(shè)置在173°角的背向檢測器進(jìn)行散射光信號采集，測試過程中，BeNano 180根據(jù)樣品的散射特點(diǎn)自動(dòng)確認(rèn)檢測點(diǎn)位置。

脂質(zhì)納米粒LNP的粒徑檢測樣品制備和測試條件

該應(yīng)用中檢測了兩個(gè)LNP采用微流控混合技術(shù)來制備核酸脂質(zhì)納米粒，該方法相對簡便快速，條件溫和，同時(shí)容易實(shí)現(xiàn)生產(chǎn)放大。1#和2#均為懸浮液，通過移液槍注入樣品池后直接進(jìn)行檢測。

通過BeNano 180內(nèi)置的溫度控制系統(tǒng)開機(jī)默認(rèn)測試溫度控制為25℃±0.1℃，測試樣品的光強(qiáng)、檢測點(diǎn)位置、測試時(shí)間均通過預(yù)測試程序自動(dòng)進(jìn)行調(diào)節(jié)。

每一個(gè)樣品在放入樣品池后進(jìn)行至少三次測試，以檢測結(jié)果的重復(fù)性和得到結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差。

脂質(zhì)納米粒LNP的粒徑測試結(jié)果和討論

表1. 動(dòng)態(tài)光散射檢測脂質(zhì)體樣品結(jié)果

圖1. 1#樣品和2#樣品多次測試的粒徑分布曲線

通過使用動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)，得到了樣品的粒徑和粒徑分布信息。通過表1中結(jié)果可以看到所有樣品的粒徑都在100-250 nm范圍內(nèi)，粒徑結(jié)果重復(fù)性良好。PDI均在0.1-0.7范圍內(nèi)，說明兩個(gè)樣品均為適中分布。1#樣品明顯粒徑更高，PDI更大，檢測的標(biāo)準(zhǔn)偏差也相對較高，說明1#樣品的均勻度不如2#樣品。